血型鉴定中红细胞悬液的制备,实验室对红细胞悬液的配制要求有哪些?

实验室对红细胞悬液的配制要求有哪些?

实验室对红细胞悬液的配制要求有： 1.用于一般实验的红细胞悬液，如血型鉴定、配血等的红细胞悬液的配制至少要用大量生理盐水洗一遍，通过洗涤可以去除红细胞表面的少量血浆蛋白、已溶解红细胞的基质、可溶性的抑制物及抗凝剂等。

2.第1次洗涤后若有溶血现象，则要洗第2次。如果第2次洗涤后上清仍不完全清澈，则此红细胞不宜使用。

3.红细胞悬液常用浓度有2%、5%和10%，配制时应将最后一次洗涤的红细胞3000转/分离心30分钟压积，在不除去上层盐水的情况下，吸取一定量压积红细胞按体积百分比配成所需浓度的悬液。 4.实际工作中，可用一般洗涤压积的红细胞1滴，加8滴生理盐水，所配成悬液约为10%，再按此比例稀释成其他所需浓度的悬液。

怎样配制5%红细胞悬液

首先全血离心1000rpm 10min，（离心后加生理盐水，混匀，去掉上清液后再离心，可重复这个步骤，直至离心后上清液透亮）制备压积红细胞，然后取一滴压积红细胞和九滴生理盐水混匀，这是为10%的红细胞悬液，取此悬液5滴，加生理盐水5滴，混匀，应该就是5%的红细胞悬液。

还有以下的 2 %标准红细胞悬液的制备：按需要型别，取全血1ml，加等渗盐水2 ~3ml，充分 摇匀离心沉淀，弃去上清液，然后再加生理盐水2 ~3ml 按上述方法洗涤，共三次，最 后取压积红细胞2 滴，加新鲜等渗盐水4 ml ，轻轻摇动，即成所需2 %的标准红细胞悬液。

取压积红细胞5 滴，加新鲜等渗盐水4 ml ，即成5 %红细胞悬液。 取压积红细胞5 滴，加新鲜等渗盐水2 ml ，即成10 %红细胞悬液。 标准红细胞盐水悬液临用前制备，最多存放3 天，用 ACD 溶液保存最长可保存1周。

交叉配血试验方法是什么

试验方式

交叉配血试验有多种方式，如盐水法、胶体介质配血法、抗球蛋白法、聚凝胺法等。

胶体介质配血法

1、首先准备好受血者和献血者的血样。

2、配好用受血者血清配成的2%的红细胞悬液；用献血者血清配成的2%红细胞悬液。

3、主侧加受血者血清0.5ml，献血者血清配成的2%红细胞悬液0.25ml。

4、次侧加献血者血清0.5ml，受血者血清配成的2%的红细胞悬液0.25ml。

5、37度水浴箱孵育1小时，后观察有无凝集或溶血。

微柱凝胶试验

微柱凝胶试验（Microtubes Gel Test,MGT）是20世纪90年代先后进入国内实验室并用于交叉配血的新方法。在一些先进国家已成为常规的红细胞血型血清学检测技术。而凝聚胺用于不完全抗体的测定与鉴定以及交叉配血等血清学试验也已在国内迅速推广使用。该方法简便、时间短、结果明显。

材料和试剂

诊断用人血型抗A血清、诊断用人血型抗B血清（常在血清中加入不同颜色的染料以示区别，如A型红色，B型蓝色）、生理盐水、供血者血清、受血者血清、供血者的2%红细胞悬液、受血者的2%红细胞悬液。

器具

凹玻片或载玻片、小试管、尖嘴滴管、无菌刺血针、牙签、酒精棉球、无菌干棉球、试管架、显微镜、记号笔等。

过程

取小试管2支，分别标明1、2;

摇匀，3000rpm离心2~3min;

结果观察

先观察上清液的颜色，然后再轻摇试管观察有无红细胞凝集现象发生；

结果判定：如试管内红细胞呈均匀混浊无颗粒出现即无凝集，上清液呈正常血清状颜色为交叉配血试验相合。如上清液呈红色即有溶血现象，红细胞成块即为凝集现象，为交叉配血试验不相合

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