常用盐水凝集法检测红细胞上存在的血型抗原,以及血清中存在的血型抗体,依据抗原抗体存在的情况判定血型。常规的方法有:①正向定型:用已知抗体的标准血清检查红细胞上未知的抗原。②反向定型:用已知血型的标准红细胞检查血清中未知的抗体。结果判定:凡红细胞出现凝集者为阳性,呈散在游离状态为阴性。
一般我们体检时查血型用的是第一种正向定型,即一般把分别血液滴在抗A血清(我记得是通常标记为蓝色)和抗B血清(标记为黄色),看看那个凝集了。抗A的凝集了(即血液滴上后红细胞马上聚集沉淀继而保持蓝色)而抗B的没凝(即呈现血液的红色)就是A型,反之一红一黄就是B型,两个都凝了(一蓝一黄)是AB型,两个都没凝(红色)是O型。这是ABO血型检测。
至于rh血型检测,同理用盐水介质凝集法。
有试管法和玻片法。
(1)试管法:①取洁净小试管3支,分别标明抗A、抗B和抗A、B,用滴管分别加抗A、抗B和抗A、B分型血清各2滴于试管底部,再以滴管分别加入受检者3%~5%红细胞盐水悬液1滴,混合。②另取洁净小试管3支分别标明A,B和O型细胞,用滴管分别加入受检者血清1~2滴于底部,再分别以滴管加入A、B和O型3%试剂红细胞悬液1滴混匀。
③120g离心1分钟或1300g离心15秒。④将试管轻轻摇动,使沉于管底的红细胞浮起,先以肉眼观察有无凝集(溶血)现象,如肉眼不见凝集,应将反应物倒在玻片上,再以低倍镜检查。
⑤观察结果时,既要看有无凝集,更要注意凝集强度,此有助于A,B亚型、类B或cisAB的发现。 (2)玻片法:①清洁玻片一张(或白瓷版一块)。
标明抗A、抗B和抗A、B,分别用滴管滴加抗A、抗B和抗A、B分型血清1滴,再加受检者3%~5%红细胞悬液1滴,混合。②另取洁净玻片一张(或白瓷板一块)。
标明A细胞、B细胞和O型试剂,分别加红细胞悬液1滴。 ③将玻片(或白瓷板)不断轻轻转动(在室温18~22℃),使血清与细胞充分混匀连续约15分钟,以肉眼观察有无凝集(溶血)反应。
如以玻片试验时,也可用低倍镜观察结果。
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